Méthode de mesure électrochimique des TPMET en continu
Les membranes plasmiques des cellules animales sont impliquées dans des réactions d’oxydo-réduction qui conduisent à la réduction de composés extracellulaires. Ces transferts sont connus sous le nom de transferts d’électrons au travers de la membrane plasmique, soit trans-Plasma Membrane Electron Transfer (t-PMET) en anglais.
Ces réactions sont le signe d’une cellule viable et elles sont classiquement évaluées par un dosage spectrophotométrique. Durant un dosage spectrophotométrique classique, la concentration d’un médiateur redox oxydé s’accumule au sein de la solution et tend à inhiber progressivement l’activité métabolique.
Avantages concurrentiels
- Mesure en continu sur de longues périodes (plusieurs heures)
Application
- Mesure de la viabilité cellulaire
Propriété intellectuelle
- Brevet
Étape de développement
Validation de la technologie en environnement réel
Laboratoire
Laboratoire de Génie Chimique (LGC) INPT ENSIACET
Description
La technologie consiste en une méthode de mesure électrochimique des tPMET en continu à l’aide d’une électrode.
C’est un outil de recherche permettant de mesurer de viabilité de cellules en milieu de culture.
Les cellules réduisent un médiateur redox et la concentration de la forme réduite est mesurée par électrochimie. Ce dispositif se substituerait à toutes les mesures basées actuellement sur le suivi de tPMET par dosage spectrophotométrique. A la différence des méthodes spectrophotométriques, le dosage électrochimique réduit le médiateur redox oxydé et régénère donc en continu sa forme réduite.
Spécifications techniques
La mesure peut être poursuivie sur de longues périodes :
- la concentration du médiateur redox n’est plus une limite,
- l’effet d’inhibition dû à l’accumulation de la forme oxydée du médiateur est levé.
- les tests ont été réalisés avec des électrodes commerciales, à titre d’exemple, DropSens en carbone (DRP 110, Metrohm-DropSens).
- l’électrode de travail est un disque de 4 mm de diamètre entouré par l’électrode auxiliaire et la pseudo-référence en argent, le tout déposé par jet d’encre (screen printed) sur des bandelettes